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英文名称:Rhodamine WGA
中文名称:麦芽凝集素, 罗丹明
性状:液体
颜色:Brown to red
规格:5mg,10mg,25mg
纯度:95%+
二、作用机制1. 糖结合机制(WGA部分)
WGA能特异性识别并结合细胞表面的糖类分子,主要通过以下步骤:
展开剩余80%特异性结合:WGA的活性位点与N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)残基高度亲和。GlcNAc是细胞膜糖蛋白和糖脂中常见的糖基,WGA优先结合其二聚体或三聚体结构。
WGA还能结合唾液酸或N-乙酰氨基半乳糖,但GlcNAc是主要靶点,结合能力更强。
例如,在细胞膜上,WGA与GlcNAc残基形成氢键和疏水相互作用,导致稳定复合物。
结合位点:WGA具有两个相同的糖结合位点(每个单体),能与3-4个GlcNAc单位互补。和指出,结合涉及β-1,4-GlcNAc连接序列,而单糖如甘露糖胺(ManNAc)不结合,半乳糖胺(GalNAc)结合较弱。这解释了WGA对特定细胞类型(如哺乳动物细胞或革兰氏阳性细菌)的特异性。
生物学效应:结合后,WGA可能影响细胞功能,如抑制细胞生长或激活信号通路,但Rhodamine WGA主要用于标记而非治疗,核心机制是“锁钥式”糖识别。
2. 荧光检测机制(Rhodamine部分)
Rhodamine荧光染料的作用是使WGA的结合可视化:
荧光原理:罗丹明染料(如Rhodamine或Tetramethylrhodamine)通过活性基团与WGA的游离氨基(-NH2)共价结合。在激发光(约550 nm)照射下,染料吸收能量并跃迁至激发态,随后发射红光(570-580 nm)。详细说明,这种荧光信号强度高、稳定性好,适合长时间成像。
信号生成:当Rhodamine WGA结合细胞膜糖分子时,复合物在荧光显微镜下发出明亮荧光。和描述,这能清晰显示细胞膜表面结构,甚至用于三维重建。荧光强度与结合量成正比,便于定量分析。
优势:Rhodamine的光稳定性优于一些蓝色染料,且水溶性好,减少背景噪声。和强调,它在神经科学中用于神经纤维标记,因其能穿透组织并提供高对比度图像。
3.Rhodamine WGA的完整作用机制可概括为:
步骤一:靶向结合:Rhodamine WGA通过WGA部分特异性结合细胞膜上的GlcNAc或唾液酸残基,形成稳定复合物。这发生在细胞表面糖蛋白、糖脂或微生物细胞壁(如细菌肽聚糖)。
步骤二:荧光激活:结合后,Rhodamine部分在激发光(550 nm)下发射红光(575-580 nm),使结合部位可视化。信号强度高,可实时观察细胞膜动态(如内吞或迁移)。
应用机制:在实验中,Rhodamine WGA常用于:
细胞膜标记:如和所述,用于成像细胞膜糖蛋白分布或酵母出芽痕。
糖蛋白研究:和提到,用于纯化或鉴定糖蛋白。
神经示踪:
和显示,在神经科学中标记神经元膜。
多色成像:和指出,可与其他荧光标记物(如FITC)结合,实现多重检测。
三、关联试剂Alexa Fluor488 N3
AF430 carboxylic acid
Alexa Fluor 647 Mal
AF 647 马来酰亚胺
AF488 C5 Maleimide
Alexa Fluor488 C5 Mal
AF633 C5 马来酰亚胺
Fmoc-Lys(5-FITC)-OH
Fluorescein-PEG5-NHS ester
Fluorescein-PEG4-alkyne
FITC-Phenylboronic Acid
FITC-Lithocholic acid 3-sulfate
Fluorescein-PEG3-(N-Boc)-Amine
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